Con el objetivo de determinar la prevalencia de Mycoplasma gallisepticum y Mycoplasma synoviae en reproductoras pesadas y pollo de engorde en granjas ubicadas en la región de Gualivá y Sumapaz, Colombia, entre los años 2011 y 2014, se realizó un sistema de muestreo aleatorio simple el cual representaba el 4% de la población total de animales de dichas granjas. Seguido a esto se hizo un muestro por conveniencia en el cual la única variable que se tomó fue la viabilidad de muestras, de las cuales fueron efectivas el 65.5%, equivalentes a 755 muestras analizadas. Posteriormente se sometieron las muestras a estudio serológico, el cual se realizó por medio de dos técnicas; ELISA ((Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) y PCR (Reacción en cadena de la polimerasa). Los datos obtenidos se analizaron por medio de Epidat® 3.1 y el software Statgraphics centurión XVI; donde se trabajó con un nivel de confianza del 95%. Datos obtenidos de P <0.05, presentaron una prevalencia significativa y valores de P >0.05, no obtuvieron una prevalencia significativa de estos agentes en las muestras procesadas. Como resultado de este estudio se analizaron las 775 (100%) muestras de las cuales se obtuvieron las siguientes proporciones: 111 (14,32%) se diagnosticaron positivas a Mycoplasma gallisepticum (MG), 84 (10,83%) positivas a Mycoplasma synoviae (MS) y 560 (74,83%) positivas a otros agentes entre los cuales se encuentran bronquitis, gumboro, laringotraqueitis, Newcastle, pneumovirus, reovirus y anemia infecciosa aviar, al analizarlas con el (p>0.05) y (p<0,05) con niveles de confianza del 95% se pudo concluir que la prevalencia de esta enfermedad en la zona es muy baja y su presencia no es estadísticamente significativa. Así mismo se puede ver que las muestras procesadas obtuvieron como resultado una tendencia de aumento del porcentaje de prevalencia de las dos cepas de micoplasma estudiadas desde el año 2011 al año 2013 y un leve descenso en el año 2014, tanto en el análisis en conjunto (sin discriminar ...